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一、色谱系统(LC)参数1.色谱柱类型-反相柱(C18):适合脂溶性代谢物(脂质、甾体等),选1.7-2.1μm粒径,柱长50-150mm。-亲水柱(HILIC):覆盖极性代谢物(氨基酸、糖类),需搭配高流动相。*建议:双平台(RP+HILIC)可提升代谢物覆盖率。*2.梯度与流速-梯度时长:非靶向研究建议15-25分钟(平衡分离与通量)。-流速:0.2-0.4mL/min(超液相兼容2.1mm内径柱)。---二、质谱系统(MS)参数1.仪器类型-非靶向代谢组学:高分辨率质谱(HRMS)必备,如Q-TOF(分辨率>35,000FWHM)或Orbitrap(分辨率>60,LCMS-MS服务技术,000@m/z200)。-靶向定量:三重四极杆(QQQ),要求MRM模式,扫描速度≥500transiti/sec。2.离子源与极性-电离模式:ESI源(电喷雾)适用多数代谢物;APCI源适合低极性化合物。-正/负离子模式:必须双模式采集(覆盖>90%代谢物)。3.质量精度与动态范围-质量精度:-动态范围:≥5个数量级(定量线性关键)。---三、数据采集策略1.扫描模式-DDA(数据依赖采集):自动触发二级谱,适合未知物鉴定。-DIA(数据独立采集):如SWATH,无偏采集全碎片,适合大规模队列研究。2.分辨率与速度平衡-HRMS全扫描分辨率≥30,000,同时保证≥10Hz扫描速率(避免峰变形)。---四、关键辅助参数1.样本前处理兼容性-确保方法匹配样本类型(血浆需除蛋白,组织需匀浆)。2.质控(QC)标准-插入混合QC样本,监控RSD---建议组合-非靶向发现研究:UHPLC-Q-TOF(如SCIEX6600+)参数:HILIC/RP双柱+ESI±+DDA/DIA+60,000分辨率-靶向定量验证:UHPLC-QQQ(如Agilent6495)参数:C18柱+MRM模式+同位素内标>注:终方案需匹配科学目标——广覆盖选HRMS+DIA,高灵敏定量选QQQ,复杂样本建议双平台交叉验证。务必要求服务商提供完整QC报告及原始数据格式(如.mzML)。平台稳定性(柱效、信号漂移)比单一参数更重要。
环境样品检测用 lc ms/ms:样品前处理 3 个关键步骤。
环境样品LC-MS/MS检测的前处理三关键步骤环境样品(水、土壤、沉积物等)基质复杂,干扰物多,目标物浓度低且形态多样。的前处理是确保LC-MS/MS分析准确性和灵敏度的基石。以下三个关键步骤缺一不可:一、样品提取:释放目标物,破除基质束缚*目标:将目标分析物从复杂基质(如土壤颗粒、生物组织、腐殖质)中、选择性地释放并转移到适合净化的溶剂中。*关键考量与常用技术:*样品形态与性质:水样(直接过滤/SPE)、固体样品(土壤/沉积物需干燥、研磨、均质)。*目标物性质:极性、挥发性、酸碱性、稳定性。*溶剂选择:水样常用、沉淀蛋白;固体样品常用索氏提取、加速溶剂萃取(ASE)、微波辅助萃取(MAE)、超声萃取,溶剂多为、、或其混合液(如正己烷:=1:1)。*提取效率:优化溶剂比例、提取时间、温度、pH(尤其对酸性/碱性化合物)至关重要。例如,ASE通过高温高压提高提取效率,MAE利用微波能快速加热样品和溶剂。*挑战:克服基质效应(如土壤有机质吸附),确保目标物完全释放,同时避免降解。二、净化与富集:剔除干扰,提升信噪比*目标:选择性去除共提取的干扰杂质(色素、油脂、腐殖酸、盐类),并浓缩目标物至仪器可检范围。*关键技术与策略:*固相萃取(SPE):净化手段。利用吸附剂(C18用于非极性物,HLB广谱适用,SCX/SAX用于离子交换,Florisil/硅胶除色素油脂)选择性保留目标物或杂质。步骤包括:柱活化、上样、淋洗(去弱保留杂质)、洗脱(收集目标物)。优化淋洗和洗脱溶剂强度是关键。*液液萃取(LLE):利用目标物在两种不互溶溶剂中的分配差异。常用于初步除脂或特定场景(如酸碱分离)。*凝胶渗透色谱(GPC):基于分子大小分离,有效去除大分子干扰物(如油脂、聚合物)。*QuEChERS:针对多残留分析(如),结合提取和分散SPE(dSPE)净化(PSA除酸/糖,C18除脂,GCB除色素)。*挑战:平衡净化效率与目标物回收率,避免目标物损失或引入新污染。三、浓缩与复溶:适配仪器,定量*目标:将净化后的提取液体积减小至适合LC进样(通常几十到几百微升),并转换溶剂至初始流动相体系。*关键技术与要点:*温和氮吹:常用方法,在可控温度(避免热敏物降解)和氮气流下蒸发溶剂。适用于中等挥发性目标物。*真空离心浓缩:结合真空和离心力,在较低温度下快速浓缩,LCMS-MS服务多少钱一次,减少挥发性损失。*溶剂置换:浓缩后,常需将残留的强溶剂(如、正己烷)置换为初始流动相(如/水、/水),避免色谱峰形畸变或柱效下降。通常采用加入新溶剂后再次温和浓缩。*定容:加入少量溶剂(如100-1000μL或初始流动相),确保浓度准确。*挑战:防止低挥发性/半挥发性目标物损失(吸附、挥发),LCMS-MS服务中心,避免浓缩过程中杂质再次富集,确保终溶剂与LC-MS/MS兼容。总结:环境样品LC-MS/MS分析的成功,高度依赖于前处理对目标物的提取、对干扰物的深度净化以及终溶液的适配。每一步都需根据目标物特性和基质特点精心优化,才能有效克服基质干扰,释放LC-MS/MS高灵敏度、高选择性的潜力,为环境监测提供可靠数据。

小分子检测选LC-MS/MS服务:聚焦两大高场景在选择小分子检测服务时,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)以其高灵敏度、高特异性、强大的抗基质干扰能力和多组分同时分析能力而著称。然而,其运行成本相对较高。因此,在以下两类特定场景中,选择LC-MS/MS服务体现其“”优势,即投入的成本能获得远超其他方法的检测价值:1.复杂生物基质中痕量/超痕量目标物的定量分析*痛点:生物样本(如血液、尿液、组织、细胞裂解液)成分极其复杂,含有大量蛋白质、脂质、盐类等干扰物质,且目标小分子(如及其代谢物、内源性、维生素、神经递质、)浓度通常极低(ng/mL甚至pg/mL级别)。*LC-MS/MS的优势:*高灵敏度与特异性:MS/MS的选择性反应监测(SRM/MRM)模式能有效排除基质干扰,在极低浓度下准确识别和定量目标物,这是常规HPLC-UV/DAD或ELISA等方法难以企及的。*简化前处理:强大的抗干扰能力允许使用相对简化的样品前处理步骤(如蛋白沉淀、液液萃取),节省大量时间和人力成本,同时降低因复杂前处理带来的回收率损失和误差风险。*避免假阳性/假阴性:特异性高,结果,尤其在临床诊断、研发(如PK/PD研究)、法医毒物分析等领域,结果的准确性价值远超检测成本。*典型应用:代谢动力学研究、监测、生物标志物验证、临床/维生素检测、毒理学筛查、特定内源性小分子代谢物研究。2.多组分目标物同时筛查与定量分析*痛点:需要同时检测样本中多种结构各异、浓度范围可能相差很大的小分子化合物(如几十种甚至上百种农残、兽残、真菌、环境污染物、多组分或代谢物)。传统方法需要多次进样或多种方法组合,耗时耗力,成本高昂。*LC-MS/MS的优势:*高通量“”分析:在一次色谱分离和一次质谱分析运行中,利用多反应监测能力,可同时筛查和定量数十至数百种目标化合物。显著提高了单位时间内的检测通量。*节省综合成本:虽然单次LC-MS/MS分析成本可能高于单次HPLC或GC分析,但当目标物数量庞大时,其“一次进样,多目标分析”的特点摊薄了单个化合物的检测成本,节省了试剂、耗材、仪器占用时间和人力成本,总成本效益显著提升。*方法统一性与数据可比性:所有化合物在同一实验条件下分析,数据可比性强,中山LCMS-MS服务,方法开发和管理更。*典型应用:食品/农产品中多种残留、兽药残留筛查;环境样品(水、土壤)中多种污染物筛查;/中草药中多种添加物筛查;代谢组学中多代谢物分析。总结:LC-MS/MS服务的体现在其解决其他技术难以胜任的关键难题上。当您面临:*“从生物大海里捞极微量的针”(复杂基质痕量分析)或*“需要一次性数清一大把不同种类的豆子”(多组分同时分析)这两类挑战时,选择LC-MS/MS服务所获得的高质量数据、节省的时间与人力成本、以及由此带来的决策可靠性提升,将远超其检测费用,是的明智之选。
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